发布时间:2022-03-08 17:42:55来源:检验医学网
2月3日,来自军事医学科学院微生物流行病研究所、生物应急与临床POCT(北京市)重点实验室等机构的研究人员在BMCMicrobiology发表了一篇名为《Developmentandmulti-centerclinicaltrialsofanup-convertingphosphortechnology-basedpoint-of-care(UPT-POCT)assayforrapidCOVID-19diagnosisandpredictionofprotectiveeffects》的文章。
研究人员建立了一种基于上转发光技术的即时检测(UPT-POCT)方法,不仅可以快速诊断COVID-19,还能预测血清中和抗体(NeutralizingAntibody,NAb)活性和保护作用。
研究人员针对新冠病毒S蛋白受体结合结构域(Receptorbindingdomain,RBD)建立起一种双抗原夹心法,用于检测血清中抗新冠病毒S-RBD的总抗体。此前有研究证实S-RBD是新冠病毒中和抗体主要的抗原表位,针对S-RBD产生的特异性抗体可以阻断新冠病毒与血管紧张素转化酶ACE2结合,从而使病毒不能入侵宿主细胞,起到“中和”病毒的作用[1-3]。无论是自然感染还是主动免疫,只要是产生抗S-RBD的抗体,就能起到一定的中和作用。因此,对S-RBD特异性抗体的定量检测不仅可以作为新冠病毒感染诊断的依据,还可以预测中和活性和NAbs保护作用。
该研究中通过采集测试(T)和对照(C)的上转发光信号,将峰值之比(即T/C比)定义为检测结果,是一种定量检测方法。在对恢复期COVID-19患者血清样本进行检测后发现,UPT-POCT的T/C比不仅与ELISA检测的OD值显著相关,还具有比ELISA更低的检测限和更宽的检测范围。当临界值定义为0.25,UPT-POCT的诊断敏感性和特异性分别为98.6%和99.86%。
此外,该研究验证了NAb滴度很大程度上代表了中和抗体的保护作用,同时发现用UPT-POCT检测的T/C比与NAb滴度呈强正相关,与累积复阳率呈强负相关。
UPT-POCT的T/C值与中和抗体滴度呈正相关
UPT-POCT的T/C值与累积复发阳性率呈负相关
目前用于新冠感染诊断的PCR方法,以及用于中和抗体检测的中和实验均存在操作复杂,检测耗时较长等问题,急需一种快速诊断新冠感染和评价中和抗体保护作用的方法。
相关研究
UPT-POCT操作简便,检测快速,15分钟出结果,其检测SARS-CoV-2总抗体的灵敏度为89.15%,特异性为99.75%(n=782)。该方法对S-RBD总抗体的定量检测结果与恢复期COVID-19患者以及接种疫苗的人群的血清NAb滴度显著相关,对于保护率预测有一定的意义。
总之,这一技术可作为快速诊断新冠感染和预测中和保护作用的替代方法。
【参考文献】
[1].Premkumar,L.etal.ThereceptorbindingdomainoftheviralspikeproteinisanimmunodominantandhighlyspecifictargetofantibodiesinSARS-CoV-2patients.Sci.Immunol.5,eabc8413(2020).
[2].Wan,J.etal.Human-IgG-neutralizingmonoclonalantibodiesblocktheSARS-CoV-2infection.CellRep.32,107918(2020).
[3].Yuan,M.,Liu,H.,Wu,N.C.&Wilson,I.A.RecognitionoftheSARS-CoV-2receptorbindingdomainbyneutralizingantibodies.Biochem.Biophys.Res.Commun.https://doi.org/10.1016/j.bbrc.2020.10.012(2020).
编辑:任里程审校:小冉